离子交换柱层析条件的选择
对于分离一个特定的蛋白质,钢衬PP离子交换柱,选择什么样的柱子、离子交换剂和流动相等需根据具体情况统筹考虑,主要是根据待分离蛋白质本身的理化性质和生物学性质确定。因此,钢衬PP离子交换柱供应,在采用离子交换层析法进行蛋白质的分离之前,钢衬PP离子交换柱直销,应当对待分离的蛋白质的性质有所了解,如等电点、相对分子质量、疏水性、生物活性及测定方法、溶解性、浓度、发生聚合的可能性、稳定性以及微观不均一性等。由于多数情况下离子交换柱层析采用梯度洗脱,因而柱子都不需很长。
了解样品的等电点决定选用阳离子还是阴离子交换剂以及流动相的pH;样品的相对分子质量Mr将决定选用多大孔径的柱填料;疏水性强的样品则要求选用疏水吸附较小或亲水性载体的交换剂,以防止非特异性疏水吸附;活性测定方法可用来鉴定分离到的样品及测定回收率;样品的溶解性在选用流动相的种类时是必须考虑的,并依此决定是否要在流动相中添加促溶剂;根据样品的稳定性决定层析温度、流动相pH以及是否要在流动相中添加稳定剂;样品的浓度和含量是选择柱体积大小和每次进样量的依据;对于那些存在微观不均一的样品,由于它们在结构和性质上较其相似,所以在分离时要采用分辨率尽可能高的条件(如等梯度洗脱);对某些样品还要选用适当的样品浓度、pH和盐浓度以防止其发生聚合。